液質(zhì)方法包巡禮:LC/MS/MS糖和糖核苷酸分析方法包
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前言
若要實(shí)驗(yàn)室分析工作得心應(yīng)手,除了性能優(yōu)異的硬件,功能強(qiáng)大的軟件也是必不可少。作為提高工作效率、將分析人員從繁重的方法摸索過(guò)程中解放出來(lái)的利器,液質(zhì)方法包的出現(xiàn)降低了質(zhì)譜分析門檻、提高了實(shí)驗(yàn)室分析通量。
液質(zhì)分析方法包一般包括預(yù)先設(shè)置好的方法文件,包括LC分離條件,MS離子源參數(shù),優(yōu)化的MRM參數(shù),各目標(biāo)化合物的保留時(shí)間等,以及用于輸出定量結(jié)果的報(bào)告模板。只需準(zhǔn)備指定色譜柱、流動(dòng)相以及標(biāo)準(zhǔn)品就可以開始分析工作了。方法包導(dǎo)入后,還可以根據(jù)HPLC的配置進(jìn)行保留時(shí)間的修正。用戶也可以直觀地追加或刪除目標(biāo)成分,自行創(chuàng)建感興趣化合物的目標(biāo)成分表。
本期將為您介紹的是糖和糖核苷酸分析方法包。
背景
糖被廣泛用作動(dòng)物細(xì)胞/微生物培養(yǎng)基中的食物成分和碳源,但糖的生物活性可能因糖的類型而有很大差異。糖核苷酸(核苷酸糖)是單糖的活化形式,對(duì)體內(nèi)的聚糖、糖脂、粘多糖和其他物質(zhì)起糖基供體的作用。
單克隆抗體的聚糖結(jié)構(gòu)被定義為一個(gè)關(guān)鍵質(zhì)量屬性,但對(duì)其控制非常具有挑戰(zhàn)性。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),通過(guò)加入不同于培養(yǎng)基中常用作為碳源的葡萄糖和蔗糖的糖或糖衍生物,導(dǎo)致附著于抗體的聚糖結(jié)構(gòu)的改變。在此背景下,對(duì)培養(yǎng)基中的糖和細(xì)胞內(nèi)糖核苷酸的分析需求日益增加。另一方面,糖和糖核苷酸是高度親水的化合物,并以多種異構(gòu)體形式存在,這使得它們的分離和分析難以用常規(guī)的反相色譜進(jìn)行。
LC/MS/MS糖和糖核苷酸分析方法包,包括LC/MS/MS分析方法,其中優(yōu)化了色譜分析條件和MS參數(shù)設(shè)置,以分析25種不同的糖、氨基糖、糖酸和糖醇、9種不同的糖核苷酸、相關(guān)代謝產(chǎn)物和內(nèi)標(biāo)。此外,本方法包中還包括培養(yǎng)基、上清液和培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)代謝產(chǎn)物的前處理流程示例。使用該方法包,無(wú)需摸索方法和前處理?xiàng)l件,快速有效地即時(shí)開展糖和糖核苷酸的分析工作。
應(yīng)用
糖和糖核苷酸包括多種異構(gòu)體。要分離和測(cè)定這些異構(gòu)體,必須考慮各種分析條件,如選擇色譜柱和優(yōu)化梯度洗脫程序。該方法包推薦了分離單糖、二糖、氨基糖、糖醇和糖核苷酸的各種異構(gòu)體的理想色譜柱、流動(dòng)相和分析條件,用戶無(wú)需經(jīng)歷繁瑣的分析條件摸索優(yōu)化過(guò)程即可開始分析工作。
混標(biāo)樣品的MRM色譜圖
小結(jié)
LC/MS/MS糖和糖核苷酸分析方法包特點(diǎn):
?包括有效分離異構(gòu)體的分析方法。
?快速且高度穩(wěn)定的色譜分析條件。
?優(yōu)化的 MS/MS 參數(shù)。
?無(wú)需摸索條件、即時(shí)可用的方法,適用于島津LCMS-8045/8050/8060/8060NX。
注:本產(chǎn)品僅用于研究,不能用于醫(yī)療診斷目的。
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