摘要:本文將介紹一種測定橄欖中 27 種農(nóng)殘的分析方法。橄欖中脂類含量高達 80% 到 85%，這會對農(nóng)殘的回收率和色譜系統(tǒng)造成不利影響。因此，本研究采用一種改進的QuEChERS 方法進行樣品提取，并結(jié)合氣相色譜/三重四極桿質(zhì)譜 (GC/MS/MS) 的多反應(yīng)監(jiān)測方法進行分析。該方法在橄欖樣品的回收率、重復(fù)性和重現(xiàn)性等方面已得到驗證。結(jié)果表明，方法的定量回收率介于 70% - 120% 之間，符合 SANCO/12571 [1] 所推薦的可接受范圍，RSD < 20%。方法的農(nóng)殘定量限與法規(guī)允許的最大殘留限值相當(dāng)甚至更低

前言:農(nóng)殘分析對于人和動物健康、進出口貿(mào)易以及法規(guī)監(jiān)管來說都是十分必要的。農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用了多種農(nóng)藥，而且大多數(shù)農(nóng)藥都有相應(yīng)的法規(guī)監(jiān)管，如 GC/MS氣質(zhì)聯(lián)用儀 或 LC/MS/MS 液質(zhì)聯(lián)用儀分析測定的食品中的最大殘留限值 (MRL) [2]。氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的分析方法以選擇離子監(jiān)測 (SIM) 為基礎(chǔ)，具有相當(dāng)高的靈敏度，但同時也降低潛在的識別能力和非目標物分析/回顧性分析的性能。使用 GC/MS/MS 測定食品中適用于 GC 分析的農(nóng)藥是近十年來興起的一種有價值的方法，該方法具有更高的選擇性和靈敏度，幾乎將大部分的色譜干擾降至低甚至*消除 [3]。雖然 GC/MS/MS的靈敏度和選擇性有了很大的提高，但是共萃取的基質(zhì)成分還是會產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)，對分析結(jié)果造成負面影響。本研究使用一種優(yōu)化的樣品前處理方法，可將此不利影響降至低。

材料與方法使用一種改進的 EN 萃取方法，來提取橄欖中的 27 種農(nóng)殘。如EN 15662 [4] 中所述，這種溶劑改進型的方法包含了非極性和極性非質(zhì)子混合溶劑（乙酸乙酯：環(huán)己烷：丙酮）和極性非質(zhì)子溶劑（乙腈），可用于萃取橄欖中高脂基質(zhì)內(nèi)的農(nóng)殘成分。與僅使用極性非質(zhì)子溶劑 CAN 相比，使用非極性和極性非質(zhì)子混合溶劑能夠為可萃取化合物提供更廣泛的極性范圍。本文研究的農(nóng)藥包括有機氯、有機磷和擬除蟲菊酯農(nóng)藥。儀器與耗材• Agilent Bond Elut QuEChERS EN 萃取試劑盒（部件號5982-5650）• Agilent Bond Elut QuEChERS 分散試劑盒，EN 方法，15 mL（部件號 5982-5156）• Agilent SPE 散裝吸附劑，C18 封端（部件號 5982-8082）• Agilent J&W HP-5ms 超高惰性氣相色譜柱，30 m × 0.25 mm（部件號 19091S-433UI）• Agilent 7890A GC• Agilent 7000A 三重四極桿 GC/MS 系統(tǒng)• Agilent 7693 自動液體進樣器溶劑與農(nóng)殘標樣• 乙酸乙酯，農(nóng)殘分析純度，購自 Baker 公司• 環(huán)己烷，農(nóng)殘分析純度，購自 Sharlau 公司• 丙酮，農(nóng)殘分析純度，購自 Baker 公司• 混合溶劑∶乙酸乙酯∶環(huán)己烷∶丙酮 (1∶1∶4)• 農(nóng)殘標樣，購自 Dr. Ehrenstorfer

氣相色譜條件載氣： 恒壓，22.0 psi柱溫： 初始溫度 70 °C (2 min)，25 °C/min 升至 150 °C(0 min)，3 °C/min 升至 200 °C (0 min)，8 °C/min升至 280 °C (10 min)進樣器溫度： 250 °C隔墊吹掃： 開啟，3 mL/min分流出口吹掃流速： 100 mL/min（0.75 min 時）進樣： 不分流進樣，1.0 µLRTL 化合物： 甲基毒死蜱質(zhì)譜條件離子源： EPC離子源溫度： 280 °C碰撞氣體： 氦氣淬滅氣體，開啟，2.35 mL/min氮氣碰撞氣體，開啟，1.5 mL/min傳輸線溫度： 280 °CMS 四極桿 1,2 溫度： 兩者均為 150 °CMS1/MS2 分辨率： 寬/寬MRM 設(shè)置： 見表 1

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樣品前處理橄欖摘自當(dāng)?shù)亻蠙鞓?。將橄欖切成薄片，稱量部分（約 1 g）用于分析，剩余的冷凍保存。如果有橄欖核，將其剔除，并計算最終樣品中橄欖核的百分含量。這是一項關(guān)于 LMR 計算的法規(guī)要求。取有代表性的橄欖樣品（2 或 3 整片）對橄欖核比重進行估算，方法如下：首先，稱取含有橄欖核的代表性樣品。然后，剔除橄欖核并稱量。最后，根據(jù)公式 1 計算橄欖核的百分含量。

結(jié)果與討論所有目標農(nóng)殘均在 HP-5ms 超高惰性氣相色譜柱上實現(xiàn)了分離和檢測。由于 LC/MS/MS 具有強大的選擇性，空白基質(zhì)的 MRM 色譜圖中未顯示目標分析物的干擾峰。圖 1 所示為經(jīng)改進的 EN QuEChERS 方法制備的 20 µg/kg 加標橄欖提取液的GC/MS/MS 譜圖。圖 2 表明橄欖和橄欖油分析中具有挑戰(zhàn)性的農(nóng)藥（如特丁津和毒死蜱）的定量分析結(jié)果十分優(yōu)異。