摘要：本文建立了一種運(yùn)用三重四極桿氣質(zhì)聯(lián)用儀（GC-MS/MS）來檢測(cè)水產(chǎn)品中多溴聯(lián)苯醚的分析方法。試樣中加入內(nèi)標(biāo)物 BDE-77 后進(jìn)行索氏提取，提取液經(jīng)自動(dòng) GPC 系統(tǒng)除脂，多層硅膠層析柱凈化后，在 15 m 長(zhǎng)的毛細(xì)管氣相色譜柱上分離，采用 GC-MS/MS 的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（Timed-SRM），以保留時(shí)間和離子對(duì)（母離子和子離子）信息來定性，以響應(yīng)值高的離子對(duì)進(jìn)行定量。結(jié)果表明，該方法的檢測(cè)限為 0.1 pg/ul，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為 2.29-5.58%。

前言： 多溴聯(lián)苯醚 (polybrominated diphenyl ethers,PBDEs) 屬于溴代阻燃劑 (brominated flame retardants, BFRs) 的一種 , 由于其優(yōu)良的阻燃效率、熱穩(wěn)定性而被廣泛地應(yīng)用于建材、紡織、化工、電子電器等行業(yè) . 近 10 年來世界對(duì) PBDEs 的需求量大幅增加，我國(guó)自 20 世紀(jì) 80 年代初以來 , 十溴聯(lián)苯醚已經(jīng)成為國(guó)內(nèi)產(chǎn)量最大的含溴阻燃劑。作為一種添加型的阻燃劑 , PBDEs 易于從產(chǎn)品中特別是在電子廢品堆放及回收利用過程中向環(huán)境中釋放 .1981 年在瑞典的梭魚、鰻鱺和海鱒中發(fā)現(xiàn)了 PBDEs 的存在 [1], 之后又在海魚、貽貝、底泥中檢測(cè)到了 PBDEs[2].1987 年 ,Jansson 等人 [3] 首次提出把 PBDEs 歸結(jié)為一類全球性的環(huán)境污染物 , 自此不斷有報(bào)道從空氣、水和人體中檢出 PBDEs, 并且最近幾年在世界范圍環(huán)境中其含量呈快速上升趨勢(shì) [4~8]. 一個(gè)對(duì)瑞典母乳中 POPs 比較詳細(xì)的調(diào)查顯示 , 母乳中其他 POPs 如多氯聯(lián)苯從 20 世紀(jì) 70 年代至 90 年代呈減少趨勢(shì) , 但是 PBDEs 含量一直處于遞增趨勢(shì) [9]. 此后 , 歐洲、北美、日本、中國(guó)等地區(qū)相繼開展了關(guān)于人體中 PBDEs 污染的研究。本研究采用自動(dòng) GPC 結(jié)合多層硅膠層析柱凈化技術(shù)進(jìn)行樣品的前處理－氣相色譜三重四極桿質(zhì)譜，建立測(cè)定水產(chǎn)品中多溴聯(lián)苯醚的方法。本文介紹了采用賽默飛世爾科技全新一代三重四級(jí)桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（TSQ 8000）分析檢測(cè)水產(chǎn)品中 7 種多溴聯(lián)苯醚的方法。通過二級(jí)質(zhì)譜掃描大大降低了復(fù)雜基質(zhì)樣品中的背景干擾影響，提高了目標(biāo)化合物的檢測(cè)靈敏度，該方法具有靈敏度低、穩(wěn)定性好、線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)

實(shí)驗(yàn)部分儀器和試劑質(zhì)譜儀器：TSQ8000 質(zhì)譜儀 ( 賽默飛世爾科技，美國(guó) )；氣相色譜儀：Trace1310 GC 配 AI 1310 自動(dòng)進(jìn)樣器 ( 賽默飛世爾科技，美國(guó) )；色譜柱：TG-5MS 15m*0.25mm*0.1μm 毛細(xì)管色譜柱；試劑：二氯甲烷，乙酸乙酯，環(huán)己烷，正己烷：農(nóng)殘級(jí)；

儀器方法氣相方法：柱溫箱：100℃ ( 維持 1.5min), 35℃ /min 到 200℃ , 25℃ /min 到 280℃ ( 維持 5min)；進(jìn)樣口：不分流進(jìn)樣，不分流時(shí)間：1min，襯管：惰性不分流（貨號(hào)：453A1925），進(jìn)樣口溫度為 280?C；載氣：恒流，1.5ml/min；傳輸線：280?C質(zhì)譜方法：離子源溫度為 300 ?C，采用 Acquisition-Timed 方法，SRM掃描，具體檢測(cè)離子對(duì)如表 1 所示：

前處理方法提?。簻?zhǔn)確稱取勻質(zhì)后的魚肉試樣 5.0g( 精確至 0.01g) 置于纖維素提取套筒中，加入相當(dāng)于 1ng 內(nèi)標(biāo) BDE-77 標(biāo)準(zhǔn)溶液，再加入適量無水硫酸鈉，以玻璃棉覆蓋，用 200 mL 正己烷 / 丙酮 ( 1 ∶ 1，v /v) 溶液進(jìn)行索氏提取 12h 以上 ( 約回流 4 次 /h) 。索氏提取后旋蒸提取液至干，以重量法計(jì)算脂肪含量。再用乙酸乙酯 / 環(huán)己烷 ( 1 ∶ 1，v/v ) 溶液溶解殘?jiān)ㄈ葜?6mL，待 GPC 凈化。GPC 凈化：將上述提取液轉(zhuǎn)移至自動(dòng)凝膠凈化系統(tǒng)，該系統(tǒng)采用低壓填充柱，柱規(guī)格為 2cm × 50cm，填料為 50 g Bio-Beads S-X3，進(jìn)樣管定容至 6mL，進(jìn)樣 5mL。流動(dòng)相為乙酸乙酯 / 環(huán)己烷 ( 1 ∶ 1，v /v) 溶液，流速 5 mL /min，等度洗脫。紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為 240nm。采用自動(dòng)溶劑蒸發(fā)系統(tǒng)收集 20 ～ 40min 的流出組分并減壓蒸發(fā)至近干，加入 2mL 正己烷復(fù)溶，待下一步凈化。多層硅膠柱凈化：在 1.5cm×10cm 的玻璃柱內(nèi)填入適量玻璃棉，然后從下往上依次填入 1 cm 高無水硫酸鈉、1g中性硅膠、3g 酸化硅膠、1g 中性硅膠和 1 cm 高無水硫酸鈉。用 10mL 正己烷預(yù)淋洗，將 GPC 凈化液轉(zhuǎn)移至層析柱內(nèi)，先用 20mL 正己烷洗脫，再用 20mL 正己烷 / 二氯甲烷 ( 1 ∶ 1，v /v) 溶液洗脫。收集全部洗脫液并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至少量體積，將其轉(zhuǎn)移到進(jìn)樣小瓶中，用氮?dú)獯蹈?，加?100 μL 正己烷復(fù)溶后轉(zhuǎn)移至內(nèi)插管進(jìn)樣測(cè)定。

標(biāo)準(zhǔn)曲線及最低定量限按歐盟標(biāo)準(zhǔn)，在陰性試樣中加入標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和內(nèi)標(biāo)物（PBDE-77，10 pg/ul）， 添 加 PBDEs 濃度為 0.5pg/ul，1pg/ul，2pg/ul，5pg/ul，按照 2.2 進(jìn)行色譜－質(zhì)譜分析。以S/N=3為檢出限，檢出限譜圖示于圖3。由圖3可以看出，7種PBDEs的S/N=均大于3。以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)（X），定量離子對(duì)的色譜峰面積為縱坐標(biāo)（Y），求得回歸方程。7 種 PCBs 在 0.5pg/ul ～ 5pg/ul 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于 0.991，線性方程示于圖 4。本方法的檢出限優(yōu)于文獻(xiàn)報(bào)道值，可保證樣品中 7 種 PBDEs 殘留的定性與定量檢測(cè)

結(jié)論本方法采用 ThermoFisher 公司全新一代三重四級(jí)桿質(zhì)譜TSQ8000 測(cè)定水產(chǎn)品中 7 種多溴聯(lián)苯醚的殘留，樣品提取率高，操作方便。儀器具有選擇性好，線性范圍寬，靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。同時(shí) TSQ8000 提供的離子對(duì)掃描可以極大得去除假陽性的干擾，從而使檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確。在復(fù)雜基質(zhì)中，儀器的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD, n=7）為 2.29-5.58%。該分析測(cè)試方法中所涉及的 7 種多溴聯(lián)苯醚最低檢測(cè)限為 0.1 pg/ul。*可以滿足歐盟及各國(guó)對(duì)多溴聯(lián)苯醚類物質(zhì)的檢測(cè)要求