簡介：由于大麻對癌癥、多發(fā)性硬化癥和 肌萎側(cè)索硬化癥（ALS）等疾病 具有治療效果，美國超過半數(shù)的地 區(qū)已經(jīng)將醫(yī)用大麻的使用合法化。1-3 與傳統(tǒng)的農(nóng)作物一樣，農(nóng)藥有時也用于大麻種植中， 以保護大麻免受蟲害，并提高產(chǎn)量。長期接觸農(nóng)藥會引起嚴重的健康風險；因此，大麻中 的農(nóng)藥分析對于消費者的安全來說是一個重要的話題。近來，新聞報道稱，受農(nóng)藥殘留高 度污染的大麻產(chǎn)品比例驚人，導(dǎo)致大麻產(chǎn)品召回，并引發(fā)公共安全警報?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，大麻 花上殘留有禁用的農(nóng)藥，如，腈菌唑、吡蟲啉、阿維菌素、乙螨唑和螺蟲酯，這些農(nóng)藥殘 留物在大麻提取物和大麻食用品中得到了進一步的濃縮。2015 年 10 月，由于農(nóng)藥污染， 科羅拉多州召回了 20,000 包大麻花，2016 年 11 月，俄勒岡州針對特定批次的da麻發(fā) 布了健康警報。而且，現(xiàn)今的許多大麻產(chǎn)品都是通過燃燒吸入，因此，消費者和監(jiān)管機構(gòu) 越來越擔心吸入農(nóng)藥化合物的未知影響。4-5 除農(nóng)藥外，大麻的生長條件也有利于霉菌和真 菌的生長，這些霉菌和真菌會產(chǎn)生致癌的真菌毒素，包括赭曲霉素 A 和黃曲霉毒素。因此， 對大麻中農(nóng)藥和真菌毒素的檢測對于確保消費者安全和質(zhì)量控制來說至關(guān)重要。

 高效液相色譜 - 串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）已成為農(nóng)藥和真 菌毒素分析的方法，因為它具有*的選擇性、靈敏度、 重現(xiàn)性，而且在分析前無需繁雜的樣品前處理。盡管已有 氣相色譜 - 質(zhì)譜法（GC-MS/MS）可用于大麻樣本中的農(nóng)藥 分析，但此類方法只適用于一小部分分析物。諸如dign酰肼（極 性較大化合物）以及阿維菌素（高分子量化合物）之類的 化合物，不適合用 GC-MS/MS 法進行分析，因為這些化合 物在 GC 的進樣口位置或者高溫的色譜柱中遇熱不穩(wěn)定且易 分解。對于復(fù)雜基質(zhì)中的農(nóng)藥分析，GC-MS/MS 方法不像 LC-MS/MS 方法那樣適用，因為 GC-MS/MS 方法需要繁雜 的樣品前處理，以防止復(fù)雜的基質(zhì)污染 GC 的進樣口。6,7

 由于對于大麻樣本的農(nóng)殘分析沒有聯(lián)邦指南，美國各州已 經(jīng)制定了各自的測試指南。俄勒岡州是美國第一個對大麻 中農(nóng)藥殘留分析制定綜合指南，并為大麻中 59 種農(nóng)藥設(shè)定 監(jiān)管限值的州。8 然而，加州已經(jīng)對大麻花和大麻食用品中 的 66 種農(nóng)藥（包括俄勒岡州名單上除一種農(nóng)藥以外的所有 其他農(nóng)藥，以及另外 8 種農(nóng)藥）和 5 種真菌毒素的殘留物 制定了更嚴格的殘留限值。9 目前已有大量關(guān)于大麻農(nóng)藥分 析的報告發(fā)表，但這些研究有一定的缺陷。10-12 大多數(shù)此類 研究要么沒有達到加利福尼亞州的殘留限值；要么使用耗 時的樣品前處理方法（例如，dSPE 的 QuEChERS 方法）， 且對某些農(nóng)藥的回收率較低，需要使用基于 LC-MS/MS 和 GC-MS/MS 的儀器來分析所有的農(nóng)藥。這大大增加了分析 的成本、復(fù)雜性和分析時間。在本項研究中，珀金埃爾默 （PerkinElmer）應(yīng)用開發(fā)團隊分析了添加在大麻花提取物 中的所有 66 種農(nóng)藥（包括典型的用 GC-MS/MS 方法分析的 極度疏水性農(nóng)藥和含氯農(nóng)藥）和五種真菌毒素，其分析結(jié) 果遠遠低于加利福尼亞州規(guī)定的殘留限值。LC-MS/MS 儀器 使用電噴霧離子源（ESI）和大氣壓化學電離源（APCI）以 及采用簡單的溶劑提取方法，該方法對所有分析物的回收 率都達到了 70%-120% 的可接受范圍。

實驗 硬件 / 軟件 采用珀金埃爾默 LC-MS/MS QSight ? LX50 UHPLC 系統(tǒng)進行 色譜分離，同時利用具有雙離子源，即電噴霧離子源（ESI） 和大氣壓化學電離源（APCI）的珀金埃爾默 QSight 220 MS/ MS 檢測器進行檢測，該檢測器獨立運行，具有兩個獨立的 離子源入口。所有的儀器控制、數(shù)據(jù)采集和數(shù)據(jù)處理都使 用 Simplicity ? 3Q 軟件平臺完成。 樣品制備方法 下面是 10 倍稀釋后的樣品制備步驟： 取大約 5 g 大麻花，作為每個樣品批次的代表物，用研 磨機研磨。

 量取 1 g 的樣品，放入 50 mL 離心管中。 添加 10 μL 的內(nèi)標溶液。 將 3 個鋼球（直徑 10 mm）加到試管中，以便提高渦 旋混合時的提取效率。 加入 5 mL LC/MS 級的乙腈到試管中，并將其蓋緊。 將試管放置在多管旋渦混合器上，渦旋混勻 10 分鐘。 以每分鐘 3000 轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速離心 10 分鐘。 用 0.22 um 的尼龍注射器將溶劑過濾到 5mL 的安珀瓶 中，并將其蓋緊。 將樣本 ID 貼在瓶子上。 取 0.5 mL 的提取樣品轉(zhuǎn)移到 2 mL 的液相小瓶中，再 用 0.5 mL 的 LC/MS 級乙腈稀釋，并混合。 注入 3 ?L 的樣本，使用農(nóng)藥方法進行 LC-MS/MS 分析。

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結(jié)論 本研究論證了一種*的、定量的、快速且可靠珀金埃爾默LC-MS/MS 方 法，用于分析大麻樣品中不同的大麻農(nóng)藥和真菌毒素殘留物。 所提出的溶劑萃取法適用于符合加州條例規(guī)定的實驗室要求， 因為從大麻基質(zhì)中提取的所有農(nóng)藥和真菌毒素的回收率 RSD 都 在 70%-120% 的可接受范圍內(nèi)，且相對標準偏差（RSD）小 于 20%。這種方法可用于定性和定量分析低濃度（0.005-0.25 ?g/g）的所有 66 種農(nóng)藥和五種真菌毒素，遠低于加利福尼亞 州確定的分析限值，且精確度較高。這種方法能對所有 66 種 農(nóng)藥（包括通常采用 GC-MS/MS 方法分析的極疏水性化合物和 含氯化合物）以及五種真菌毒素進行篩選和定量，成為使用單 一儀器對大麻中的農(nóng)藥和真菌毒素進行篩選和定量的一種新穎 方法。